PENGUJIAN LABORATORIUM UNTUK MENENTUKAN SIFAT BAKTERI GRAM POSITIF ATAU NEGATIF

Pewarnaan gram digunakan untuk menentukan jenis kuman (bakteri) , apakah termasuk golongan gram positif atau golongan gram negatif. yang termasuk gram positif adalah segolongan bakteri yang menahan persenyawaan yang disebut iodinedye complex yang terbentuk dari KI dan I2 dengan zat warna kristal violet sewaktu dicuci ( zat pengangawarna ) . Yang termasuk gram positif adalah segolongan bakteri yang melepaskan persenyawaan dan zat tadi , tapi mengikat zat warna berikutnya yaitu karbol fuksin encer.

dari penjelasan singkat diatas kita tau bahwa pewarnaan gram itu memiliki lebih dari 1 macam zat pewarna yang bertujuan untuk menggolongkan sifat bakteri, berikut cara pengujian untuk menentukan sifat bakteri gram positif atau negatif :

alat yang digunakan :

kaca preparat 2 buah
ose
lampu spiritus / api bunsen
mikroskop

bahan yang diperlukan :

suspensi bakteri berumur 24 jam
zat warna kristal violet
ammonium oxalat
lugol encer
aceton iodine
karbol fuchsin
tissu
alkohol

cara pengujian :

2 buah kaca preparat yang disediakan dibersihkan menggunakan alkohol sampai terbebas dari kotoran dan lemak lalu fiksasi di atas lampu spiritus
fiksasi ujung ose hingga berwarna merah ,diamkan beberapa detik lalu kemudian ambil biakan bakteri yang ada pada suspensi bakteri
letakkan suspensi bakteri tersebut ke bagian tengah kaca preparat
beri zat pewarna ammonium oxalat kristal violet selama 30 detik
kelebihan zat pewarna dibuang lalu ditetesi langsing dengan menggunakan lugol selama 30 detik
kelebihan zat pewarna dibuang lansung dibilas dengan larutan aceton iodine selama 30 detik (pengangawarna)
dicuci dibawah air keran sampai tak ada zat warna yang mengalir
teteskan zat warna karbol fuchsin selama 30 detik
kelebihan zat warna dibuang lalu dicuci dibawah air mengalir
keringkan menggunakan tissu dengan cara diletakkan tampa menggosok permukaan preparat
lakukan pengamatan menggunakan mikroskop dengan pembesaran lensa objektif 100x
catat hasil pengamatan
buatlah laporan pengujian

catatan :

-bakteri gram positif berwarna ungu

-bakteri gram negatif berwarna merah

Demikianlah pengujian penentuan sifat bakteri gram positif atau negatif yang saya ketahui, jika teman teman punya pertanyaan atau saran tulis dikolom komentar yah!! terima kasih

baca juga artikel :

-pewarnaan negatif

-pewarnaan positif

-mikroskop

-ose

-zat pewarna karbol fuchsin